本教材共7章，第1～5章围绕生物分子的提取制备、分离纯化、定性与定量测定、酶动力学检测、代谢研究等内容，共编写基础性实验和综合性实验46个，实验技术涵盖离心、层析、电泳、膜分离、光谱技术等，难易度不同，可在实际教学中灵活选择。第6章为研究性实验，旨在满足本科生参与创新性实验或竞赛等实践教学活动需要，包括抗体制备、转基因植物/动物鉴定、RNA干扰、蛋白质的外源表达，以及表观遗传学研究等实验方法共12个，均为常用技术，可作为本科生和研究生开展科研的实验方法工具参考。第7章为生物化学交叉生物信息学的“干实验”，是为了适应大数据时代和培养具备数据分析能力本科生的需求而编写，包括基因和蛋白质结构分析、系统发育树的构建、蛋白质互作预测，以及AlphaFold预测蛋白质三维结构等独具特色的内容。教材最后为附录，既包括实验室安全与防护、基本实验操作、溶液配制等基础内容，还包括生物伦理与生物安全的有关知识。

本教材适用于高等院校生物化学实验教学，也可作为研究生学习和从事科研活动的参考书。

前辅文
第一章 氨基酸与蛋白质
  实验1 氨基酸的分离、鉴定
   1.1 氨基酸的纸层析分离
   1.2 氨基酸的离子交换层析分离
   1.3 植物组织中总氨基酸的含量测定
   1.4 豆类萌发时氨基酸含量的变化
  实验2 肽的序列分析——PTH法测谷胱甘肽序列
  实验3 蛋白质与氨基酸的呈色反应
   3.1 双缩脲反应
   3.2 茚三酮反应
   3.3 黄色反应
  实验4 蛋白质的沉淀反应与蛋白质等电点的测定
   4.1 蛋白质的沉淀反应
   4.2 等电点沉淀法测定蛋白质等电点
   4.3 等电聚焦电泳法测定蛋白质等电点
  实验5 牛乳中酪蛋白的制备
  实验6 蛋白质含量测定
   6.1 考马斯亮蓝染色法（Bradford法）
   6.2 紫外吸收法
   6.3 BCA法
  实验7 乙酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质
  实验8 蛋白质分子量的测定
   8.1 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法
   8.2 凝胶过滤层析法
  实验9 蛋白质样品中盐分的去除
   9.1 透析法
   9.2 凝胶过滤层析法
   9.3 离心超滤法
  实验10 综合性实验——细胞色素c的制备
   10.1 细胞色素c粗品的制备
   10.2 细胞色素c的精制及含量测定
第二章 酶
  实验11 马铃薯过氧化氢酶的制备及其催化高效性观察
  实验12 唾液淀粉酶的基本性质
  实验13 过氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离与鉴定
  实验14 血清乳酸脱氢酶同工酶琼脂糖凝胶电泳法分离与鉴定
  实验15 血清中谷丙转氨酶活性的测定
  实验16 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较
  实验17 综合性实验——酵母蔗糖酶的分离纯化与酶学性质研究
   17.1 酵母蔗糖酶的提取与纯化
   17.2 温度和pH对酵母蔗糖酶活力的影响
  实验18 综合性实验——碱性磷酸酶的制备、鉴定及动力学研究
   18.1 动物肝碱性磷酸酶的提取和比活力测定
   18.2 凝胶过滤层析纯化碱性磷酸酶
   18.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定碱性磷酸酶的分子量
   18.4 碱性磷酸酶Km和Vmax的测定
  实验19 综合性实验——α-淀粉酶的制备、鉴定及动力学研究
   19.1 枯草芽孢杆菌α-淀粉酶的分离纯化（疏水层析法）
   19.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定α-淀粉酶
   19.3 α-淀粉酶的酶活力测定
   19.4 α-淀粉酶的酶动力学研究
  实验20 综合性实验——溶菌酶的制备及其性质研究
   20.1 蛋清中溶菌酶的分离纯化
   20.2 纯化产物的蛋白质含量与酶活力测定
   20.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定溶菌酶
   20.4 溶菌酶的酶促动力学研究
第三章 核酸
  实验21 DNA的提取
   21.1 植物总DNA的提取（CTAB法）
   21.2 动物组织总DNA的提取（酚/氯仿抽提法）
   21.3 细菌DNA的提取
  实验22 RNA的提取
   22.1 酵母RNA的分离及组分鉴定
   22.2 动物组织总RNA提取（TRIzol?试剂法）
   22.3 植物总RNA的提取（TRIzol?试剂法）
  实验23 核酸的含量与质量检测
   23.1 二苯胺显色法测定DNA的含量
   23.2 紫外分光光度法
   23.3 琼脂糖凝胶电泳法
第四章 糖、脂和维生素
  实验24 果蔬中蔗糖、葡萄糖和果糖的测定（分光光度法）
  实验25 面粉中总糖与还原糖的测定（DNS法）
  实验26 黄瓜和马铃薯中还原糖含量的比较（铁氰化钾法）
  实验27 马铃薯中淀粉的提取和水解
  实验28 食用菌多糖的提取、纯化及鉴定
  实验29 血糖含量的测定（Folin-Wu法）
  实验30 肾上腺素和胰岛素对动物血糖的影响（GOD-PAP法）
  实验31 油料种子中油脂含量的快速测定（折光法）
  实验32 脂肪碘值的测定（Hanus法）
  实验33 脂肪酸值的测定
  实验34 脂肪皂化值的测定
  实验35 花生中粗脂肪提取与含量测定（索氏抽提法）
  实验36 卵黄中卵磷脂的提取与鉴定
  实验37 血清甘油三酯的测定
  实验38 血清总胆固醇的测定
  实验39 胡萝卜素的定量测定（纸层析法）
  实验40 水果中维生素C的含量测定（磷钼酸法）
  实验41 维生素B2的含量测定（荧光分光光度法）
第五章 新陈代谢
  实验42 糖酵解中间产物的鉴定
  实验43 饱食和饥饿对小鼠肝糖原含量的影响（蒽酮法）
  实验44 肌糖原的酵解作用（乳酸发酵）
  实验45 脂肪酸的β-氧化——酮体的生成及测定（碘量法）
  实验46 发酵过程中无机磷的被利用和ATP生成
第六章 研究性实验常用技术与方法
  实验47 多克隆抗体的制备、纯化和效价测定
  实验48 条件性基因敲除小鼠基因型的鉴定
  实验49 蛋白质X在大肠杆菌中的外源诱导表达及亲和层析纯化
  实验50 实时荧光定量PCR检测基因的表达量
  实验51 利用RNA干扰技术沉默基因X
  实验52 酵母双杂交实验
  实验53 植物体内蛋白质磷酸化水平检测（Phos-tag法）
  实验54 凝胶阻滞实验（EMSA）
  实验55 染色质免疫共沉淀检测转录因子-启动子结合
  实验56 模式植物拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定
  实验57 疾病模型小鼠血清中糖脂代谢物的浓度测定
  实验58 拟南芥的表观遗传学修饰——组蛋白的修饰
第七章 数字生物化学
  实验59 DNA序列下载与格式转换
  实验60 真核生物基因结构预测
  实验61 蛋白质基本性质分析
  实验62 蛋白质系统发育与功能分析
  实验63 蛋白质三维结构预测
  实验64 蛋白质-蛋白质相互作用预测
  实验65 蛋白质-DNA结合位点预测
  实验66 蛋白质-金属离子结合位点预测
  实验67 植物叶绿体基因组DNA提取、测序与组装
附录
  第一节 生物化学实验室规则及安全防护
  第二节 生物伦理与生物安全
  第三节 基本实验操作
  第四节 常用仪器使用方法
  第五节 生物化学实验学习方法
  第六节 如何撰写实验报告
  第七节 实验室常用溶液的配制
  第八节 生物化学常用参数
参考书目